Бумажная хроматография и блоттинг

Бумажная хроматографияПринцип распределительной хроматографии (distribution chromatography)  является основой разделения веществ с использованием хроматографической бумаги. Распределение разделяемых веществ между стационарной фазой (бумага в качестве носителя) и подвижной фазой (элюент) достигается благодаря различной скорости движения.

Это их свойство определяется различной природой веществ (различными коэффициентами распределения, молекулярной массой и зарядом).

Однако, могут иметь место абсорбция и ионообменные процессы.

Правильный выбор подвижной фазы очень важен для того, чтобы избежать абсорбции, в то время как качество бумаги позволяет минимизировать обменные процессы. Благодаря тщательному подбору сырья (содержание целлюлозы свыше 97%) и строгому контролю за процессом производства практически удается избежать мешающего влияния материала бумаги на процесс разделения.

Бумага сортов «FN»Бумага сортов «FN» обычно используется для хроматографической идентификации веществ, полупрепаративных и препаративных целей. Сорта FN11 – FN18 характеризуются низким содержанием примесей (зольность 0,02% в соответствии с DIN 54370) и, следовательно, обеспечивают возможность количественного анализа компонентов образца после хроматографического разделения.

Гладкая поверхность и пропорциональная толщина сортов «BF» обеспечивают постоянство транспортных характеристик на всей площади контакта. Что позволяет использовать их в различных техниках блоттинга: полусухой блоттинг, электро-блоттинг, вакуумный, dot/slot – блоттинг.

Сорт Серия Удельный вес, г/м 2 Толщина, мм Высота абсорбции, мм/30 мин Свойства / Основное применение
FN 1 501 90 0,20 145

Самая высокая скорость миграции элюента для тонких сортов аналитической бумаги; используется для серийных и повторных разделений небольших количеств веществ, когда отсутствуют повышенные требования к точности разделения

FN 2 502 120 0,25 145

Такая же высокая скорость миграции элюента, как и для сорта FN1, но поскольку бумага толще, то и емкость – больше; поверхность гладкая

FN 3 503 90 0,19 93

Мягкая поверхность; средняя скорость миграции элюента; рекомендована для анализа белка сыворотки (например, человеческий альбумин)

FN 4 504 120 0,24 93

По характеру абсорбции идентичен сорту FN3 (такая же высота абсорбции), но поверхность более гладкая; предназначена для разделения значительных количеств вещества поскольку бумага более толстая

FN 5 505 90 0,17 60

Хроматографическая бумага для аналитических целей; самая высокая точность при разделении, самая низкая скорость миграции элюента; поверхность мягкая. Используется для циркулярной и горизонтальной техники проведения анализа

FN 6 506 120 0,22 60

Скорость миграции элюента такая же как и для сорта FN5 при максимальной точности, но бумага более толстая и, следовательно, более предпочтительна для разделения значительных количеств вещества; поверхность гладкая

FN 7 507 150 0,32 145

Самая высокая скорость миграции элюента; поверхность мягкая; используется для аналитических целей, когда отсутствуют повышенные требования к точности разделения; достаточно толстая бумага для разделения больших количеств веществ или для полупрепаративных целей

FN 7а 508 200 0,32 145

Такая же высокая скорость миграции элюента и толщина как и для FN 7, но большая плотность; предпочтительна для разделения больших количеств веществ или для полупрепаративных целей

FN 8 509 280 0,55 190

Очень высокая скорость миграции элюента; поверхность мягкая; предназначена для разделения высокомолекулярных соединений в режиме электрофореза а также для препаративных целей

FN 30 526 390 0,90 235

Наиболее толстая хроматографическая бумага с самой высокой скоростью миграции элюента; используется для препаративных целей при разделении больших количеств вещества

FN 100 527 195 0,35 130

Средняя толщина; высокая скорость миграции элюента; идеальная комбинация как для хроматографии, так и для гель-блоттинга. Идеально подходит для основных целей использования блоттинговой бумаги для Южного, Северного, Западного блоттинга, также используется в технике полусухого блоттинга

BF 1 518 90 0,16 80 /10 мин

Наиболее тонкая бумага из сортов BF, средне-быстрая скорость абсорбции; используется в качестве покрытия гель-мембранного сэндвича в буферном танке при электроблоттинге

BF 2 519 190 0,36 70 /10 мин

Так как этот сорт толще и имеет немного более низкую скорость абсорбции, чем BF1, то он может быть использован и в качестве покрытия гель-мембранного сэндвича как BF1, и как защитный слой при размещении мембраны на пористой подложке в соответствии с методами вакуумного или dot/slot блоттинга

BF 3 520 330 0,76 130 /10 мин

Толщина вдвое больше, чем у BF2, высокая скорость абсорбции и емкость, хорошо подходит для транспорта буферной жидкости и как накопитель буфера согласно капиллярному и полусухому методу

BF 4 521 550 1,3 160 /10 мин

Наиболее толстая бумага для блоттинга с самой высокой скоростью абсорбции и наиболее высокой абсорбционной способностью. Предпочтительны для использования, когда небольшое количество слоев бумаги должны обеспечить высокую буферную способность. Сокращение числа слоев минимизирует риск присутствия пузырьков воздуха в упаковке блоттингового сендвича. Обычно используется для транспорта ДНК и РНК согласно технике Южного и полусухого блоттинга

 

<< Назад