Определение DENARASE эндонуклеазы

Определение DENARASE эндонуклеазы с помощью Bacillus sрОпределение DENARASE эндонуклеазы с помощью Benzonase® ELISA Kit II

Эндонуклеазы происходящие из Serratia marcescens регулярно используются в процессах очистки биологических молекул для гидролизации молекул ДНК, происходящие из клеток-хозяев.

Benzonase ® ELISA Kit II используется для определение незначительного количества эндонуклеазы экспрессированной в E.coli.

Новый разработанный производственный процесс для эндонуклеаз Serratia marcescens, которые основываются на эксперессии в Bacillus sр., которая в свою очередь имеет преимущество, являясь неэндотоксичным производственным штаммом.

Эти эндонуклеазы продаются Sartorius Stedim Biotech под маркой DENARASE. Эта статья показывает, что незначительное количество обоих эндонуклеаз экспрессированых в E.coli и Bacillus sр. могут быть определены с помощью Benzonase ® ELISA Kit II.

Материалы

- Benzonase® ELISA Kit II от Merck KGaA;
- Serratia marcescens эндонуклеазы сверхэкспрессированные в Bacillus sp. (DENARASE);
- Serratia marcescens эндонуклеазы сверхэкспрессированные в E.coli.

 

Метод

Benzonase ® ELISA Kit II от Merck KGaA состоит из антител покрывающими  микро пластины , которые специально задерживают  эндонуклеазы, происходящих из Serratia marcescens. Добавлены переоксидазы хрена обыкновенного соединенными антителами. Результат комплекса определяется по формированию видимого, желтого комплекса после добавления  ТМБ.  Реакция останавливается добавлением 0,2 М H2SO4. Результат может быть определен визуально или с помощью  считывателя ELISA пластин считывателя при 450 нм.

 

Результаты

Обе Serratia marcescens эндонуклеазы показали сходные спектры поглощения при 450 нм. Это означает, что нет существенной разницы в сродстве между антителом с ELISA Kit II  и двух эндонуклеаз продуцированы из разных штаммов. Поэтому ELISA Kit II может быть использована для определения незначительного количесвта эндонуклеазы, которые сверхэкспрессируется в Bacillus sр.


Определение эндонуклеазы